重楼抑菌效果的研究
摘要：为了检测不同浓度重楼对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌效果，我们采用了常规的微生物学免疫法圆纸片扩散法。结果显示重楼对金黄色葡萄球菌具有一定的抑制作用，而对大肠杆菌抑菌效果不甚明显。
关键词：重楼；抑菌效果；金黄色葡萄球菌；大肠杆菌
1 概论
痤疮是一种慢性炎症性皮肤病，多发于青少年，临床表现为面部粉刺HYPERLINK"http：///wiki/%E7%B2%89%E5%88%BA"＼t"http：///wiki/_blank"、丘疹HYPERLINK"http：///wiki/%E4%B8%98%E7%96%B9"＼t"http：///wiki/_blank"、膿疱、结节等多形性皮损，检测分析发现细菌则是主要的诱发因素。因为细菌可以为痤疮的生长提供良好的温床，油性肌肤最为明显[1]。目前市场上的治疗药物也是种类繁多，中西药皆有，但是并未发现效果甚少的“良药”。我们研究的中药重楼在抑癌方面的作用已有报道而其抑菌作用研究则大部分停留在理论层面上，较少应用于具体病症中，尤其是抑痘作用更为少见。研究以中药陕重楼为主，属于百合科多年生草本植物，其干燥的根茎具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊等作用。其中重楼的变种：“七叶一枝花”具有良好的抗菌消炎作用。七叶一枝花对宋内氏痢疾杆菌、黏质沙雷杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌有一定的抑制作用[2]，研究发现其对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增加有明显的抗炎作用[3]。鉴于此，本课题研究重楼乙醇提取物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制作用，为重楼抑菌消炎药物的研发提供理论支撑与新药开发提供依据。
2 实验
2.1 实验材料
2.1.1 重楼
2017年6月购买于老百姓大药房（西安市科技路西口店），属于重楼的变种之一七叶一枝花。
2.1.2 菌种
金黄色葡萄球菌、大肠杆菌由西安交通大学医学院微生物实验室提供。
2.1.3 培养基
细菌培养基：蛋白胨 10g，牛肉膏 3g，琼脂 520g，Nacl5g，蒸馏水 1000mL，PH7.07.1。
2.2 实验仪器
VD650净化工作台（石家庄泰斯特仪器设备有限公司）；M215597高压蒸汽灭菌锅（上海中西化玻仪器试剂有限公司）；BCD1667T ADZ冰箱（青岛海尔股份有限公司），2011型电热恒温干燥箱。酒精灯、电炉、接种环、打孔器、培养皿、纱布等微生物常规实验器械设备。
2.3 实验方法
2.3.1 重楼乙醇提物的制备
取重楼饮片，用70%的乙醇提取两次，第一次10BV提取2小时，第二次8BV提取1.5小时，合并提取液。
2.3.2 制作药敏片
向干燥的培养皿中倒入重楼提取液20ml，将滤纸放提取液中4小时，随后取出放在干燥的器皿里，然后将其置于60℃的电热恒温干燥箱中进行干燥，等完全干燥之后连同器皿一起取出，以作备用。
2.3.3 抑菌实验
整个实验操作过程，全部在无菌操作台中来进行操作，首先，每种细菌接种要有4个培养基，并且要把金黄色葡萄球菌和大肠杆菌分别划线及接种于培养皿培养基之上；其次，把接种环放在酒精灯上进行灭菌之后，再放入适量的细菌进行培养，最后，选择以划线的方式再将其细菌物涂抹于培养皿之上。
3 结果
根据重楼液在圆纸片上的扩散大小来判定其抑菌效果，当重楼不断的在培养基内向四周进行扩散时，在其圆纸片的周边一定范围内，对于细菌的生长程度也将会得到一定的抑制。同时，在一昼夜后也将形成一个抑菌环。通过实验确定，可以根据抑菌环的大小来判定抑菌的效果。抑菌环大小的不同，可以说明该菌种对药物的敏感性也是不同的。本实验结果如下：
由表1可知，重楼对金黄色葡萄球菌具有一定的抑制作用，且根据药敏试验判定为中敏（平均抑菌换在13.07），而重楼对大肠杆菌的抑菌作用为低敏，这对重楼在临床的推广与应用，提供了理论依据。
4 讨论
本研究以圆纸片扩散法检测到了重楼对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌作用，同时，通过实验结果可以证实，重楼具有一定的抗菌效果的，这与文献上报道的大致是相同的。重楼在我国分布广泛，资源丰富，相对于临床来说其具有十分重要的研究价值，该实验不但对重楼的抑菌抗炎作用做了积极的探讨，同时，相对于其在业内的影响，也为临床上重楼药物的使用以及新药的开发提供了一定的支持。
参考文献：
[1]范志莘，赵旺胜，施瑞华，童明庆，郁辉，郑乐.寻常痤疮细菌感染病因学探讨.临床皮肤科杂志，1996，（6）371373.
[2]王强.中药七叶一枝花类的抑菌和止血作用研究[J].中国药科大学学报，1989，20（4）：251.
[3]刁燕春，吴镝.重楼的成分及药理作用.中外健康文摘，2014.（19）1.
[4]孙桂丽，陈有为，夏国兴，吴少华，张琦，李治滢，李绍兰，杨丽源，黄荣.云南重楼植物内生真菌的分离及抗菌活性筛选[J].微生物学杂志，2005（06）.
[5]任安芝，高玉葆.植物内生真菌——类应用前景广阔的资源微生物[J].微生物学通报，2001（06）.
[6]孔庆科，丁爱云.内生细菌作为生防因子的研究进展[J].山东农业大学学报（自然科学版），2001（02）.
作者简介：孟婷婷（1983），女，汉族，陕西西安人，硕士，陕西师范大学生命科学学院，西安培华学院医学院讲师，主要研究方向：比较神经生理学。