急性白血病患者CD117与CD34的表达及临床意义
[摘要]目的 探讨CD117/CD34共表达在急性白血病（AL）诊断中的价值。 方法 利用流式细胞仪（FCM）检测了47例急性髓细胞性白血病（AML）、28例急性淋巴性白血病（ALL）和20例正常骨髓细胞CD34和CD117的表达，并比较CD117、CD34和CD117/CD34 在AML、ALL和正常人间的表达差异。 结果CD34和CD117在正常人表达为阴性。CD34在AML和ALL中均有表达，二者比较差异无统计学意义（χ2=0.0285，P = 0.8659>0.017）。而CD117在AML患者中有更高表达（40/47），但很少在ALL中表达（1/28例），两者比较差异有统计学意义（χ2=47.0698，P = 0.0000<0.017）。此外，CD117/CD34在AML中有较高表达（30/47），而在ALL中表达极低，只有1/28，二者比较亦有显著差异（χ2=26.2747，P < 0.017）。 结论CD117/CD34的共同表达可用于排除ALL，有助于AML诊断。
[关键词] 急性白血病；CD117/CD34；白细胞分化抗原
[中图分类号] R733.71 [文献标识码] B [文章编号] 1673—9701（2012）25—0058—02
The expression and clinical significance of CD117 and CD34 in patients with acute leukemia
XIE Jianxing TAN Heying PENG Min LUO Xuhua LUO Xiaohong
Department of Hematology，Xinyu People"s Hospital in Jiangxi Province，Xinyu338000，China
[Abstract] Objective To explore the value of the expression of CD117/CD34 with acute leukemia （AL）， we designed a study to compare the results of analyses of co—expression of CD34/CD117. Methods We estimated by flow cytometry （FCM） the expression of CD34 and CD117 in cells from 47 patients with acute myeloid leukaemia （AML） ，28 patients with acute lymphoid leukemia （ALL） and 20 normal bone marrows. Results CD34 was commonly expressed in all types of acute leukemias， whereas CD117 seemed to be a more expression for 40 out of 47 cases of AML patients， but rarely detected in ALL （1/28 patients）. Moreover， co—expression of CD34/CD117 was extremely rare on lymphoblasts with only 1/28 ALL patients. Conclusion Co—expression of CD34/CD117 may strongly suggest the diagnosis of AML， and it should be used in the exclusion of ALL.
[Key words] Acute leukemia；CD117/CD34；Leukocyte differentiation antigen
急性白血病（acute leukemia，AL）是造血干细胞恶性克隆性疾病，目前国际上广泛采用MICM标准对其进行诊断、分型、指导临床治疗和评估预后。其中免疫学检查不仅对白血病分型，而且对白血病细胞的性质、分化发育阶段能作出较客观的判断，对治疗及预后判断具有指导意义。随着单克隆抗体技术的发展，流式细胞术使急性白血病免疫分型结果更快速、可靠。本研究采用FCM研究CD117及CD34在ALL和AML患者骨髓单个核细胞中的表达，进一步探讨了CD117/CD34共表达的临床意义，现报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料
收集2009年1月～ 2011年12月间在我院血液内科初次就诊的急性白血病患者75例，所有病例均按《血液病诊断与疗效标准》[1]确诊。其中男47例，女28例；年龄15～70岁，中位年龄40岁。ALL 组28例，男20例，女8例，年龄15～61岁，中位年龄 26岁；AML组47例，男27例，女20例，年龄15～70岁，中位年龄42岁。在 AML 组中M0 1例，M1 2例，M2 18例，M3 6例，M4 6例，M5 11例，M6 2例，M7 1例。20例正常对照组骨髓标本均采自健康成人体检者。
1.2 免疫表型分析
抽取患者骨髓3 mL，肝素抗凝，分离骨髓单个核细胞，按常规三色直接免疫荧光法标记骨髓单个核细胞，各管均标记CD45—Percp（ Becton Dickinson），同时配以FITC、PE或PE—Cy5标记的CD2、CD4、CD34、CD5、CD38、CD56、CD8、CD64、CD71、CD11b、CD117、MPO、cCD79a、cCD3、TdT、CD123等，分析时以相应的标记荧光素作为同型对照。所有单抗均购自美国 Becton Dickinson 公司。采用流式细胞仪（BDFA salibur 型，美国 Becton Dickinson 公司）分析。在 CD45/SSC 散点图上，至少分析10 000个细胞。CD117以阳性细胞水平≥10%为阳性标准[2]，其余抗原均以抗原阳性细胞≥20%为阳性标准。
1.3 统计学处理
应用SPSS 19.0统计学软件进行分析，计数资料多个样本率的比较应用χ2检验，P < 0.05 为差异有统计学意义；其中样本率的两两比较，采用Bonferroni法，修正检验水准值α=0.017，即P < 0.017为差异有统计学意义。
2 结果
CD117、CD34、CD117/CD34在对照组、ALL组和AML组的表达差异比较有统计学意义（χ2=66.784 7、28.173 5、41.253 3，P=0.0000<0.0001）。其中指标在各组中的两两比较结果如下：①CD117、CD34、CD117/CD34在对照组中无表达；②ALL组中 CD117阳性表达率（3.571 4%）、CD117/CD34 共表达率（3.571 4%），与对照组（0%）比较差异无统计学意义（χ2=0.729 5、0.729 5，P = 0.393 1>0.017）。而CD34阳性表达率（67.857 1%）与对照组（0%）比较差异有统计学意义（χ2=22.463 1，P = 0.0000<0.017）；③AML组中CD117、CD34阳性表达率（85.106 4%、65.957 4%）、CD117/CD34 共表达率（63.829 8%），与对照组比较差异有统计学意义（χ2 =42.238 0、24.550 8、23.116 7，P = 0.0000<0.017）；而与 ALL 组比较，CD34差异无统计学意义（χ2=0.028 5，P = 0.865 9>0.017），但CD117、CD117/CD34差异有统计学意义（χ2=47.069 8、26.274 7，P = 0.0000<0.017）。见表1。
表1 CD117、CD34、CD117/CD34在对照组、ALL组和AML组中的两两比较结果
3 讨论
免疫学分型在MICM分型诊断方法中占有重要地位，在ALL和AML的鉴别诊断中具有非常重要的作用。CD117是造血干细胞因子受体膜外区域的分子表面抗原标记，在正常情况下，CD117只在正常造血干/祖细胞上有表达，极少表达于较成熟的粒细胞和单核细胞，淋巴细胞几乎没有表达。Nomdedeu等[2]报道，CD117在AML中的阳性表达率在60%～87%，与本研究CD117在AML中的阳性表达率85.106 4%（40/47）一致。沈红强等[3]研究表明，CD117主要在AML中表达，且CD117在ALL患者中也可存在一部分交叉表达。本研究亦显示，CD117在ALL和AML均有表达，阳性表达率分别依次为3.571 4%（1/28）、 85.106 4%（40/47），并且两者比较具有显著性差异（P = 0.0000，P < 0.017）。因此，当 CD117 高表达时，仍需要对其进行鉴别ALL 或 AML。
Auewarakul 等[4]研究显示，CD34表达于早期造血干/祖细胞，在AL中表达缺乏系列特异性，CD34在 ALL 和 AML（除M3外）中均可呈高表达，与本研究结果相一致。本研究中，在ALL组和AML组中CD34阳性表达率分别为67.857 1%（19/28）、65.957 4%（31/47），均有较高表达，且二者比较差异无统计学意义（P = 0.865 9>0.017），故仅根据CD34表达难以对 ALL 和 AML作出鉴别诊断。
本研究显示，CD117 /CD34 在ALL 和AML中的共表达率依次分别为3.571 4%（1/28）和63.829 8%（30/47），二者比较差异有统计学意义（P = 0.0000<0.017）。CD117 /CD34在AML患者的阳性表达率（63.829 8%）比CD117在AML患者的阳性表达率更低（85.106 4%），由此表明CD117 /CD34比CD117具有更好的髓系免疫学特征。因此 CD117 /CD34 共表达可作为 AML诊断的免疫学参考指标，协助诊断 AML。
综上所述，AML 患者骨髓CD117、CD117/CD34 的阳性表达率均高于正常人和ALL患者，可作为AML患者MICM分型诊断的髓系免疫学标志。其中CD117/CD34共表达具有更高的髓系免疫学特异性，可以辅助排除ALL，对AL患者的诊断与鉴别诊断具有重要意义。
[参考文献]
[1] 张之南，沈悌. 血液病诊断及疗效标准[M]. 第3版. 北京：科学出版社，2007：131—134.
[2] Nomdedeu JF，Mateu R，Alts A，et al. Enhanced myeloid specificity of CD117 compared with CD13 and CD33[J]. Leuke Res，1999，23（4）：341—347.
[3] 沈红强，汤永民，杨世隆，等. CD117 在白血病细胞上的表达分析[J]. 中华血液病学杂志，2003，24（5）：228—230.
[4] Auewarakul CU，Promsuwicha O，U—Pratya Y，et al. Immunophenotypic profile of adult acute myeloid leukemia （AML）：analysis of 267 cases in Thailand Asian Pac[J]. Allergy Immunol， 2003，21（3）：153—160.
（收稿日期：2012—05—31）