基于SCAR分子标记的头花蓼分子鉴定研究

时间：2022-12-06 17:55:06 来源：正远范文网 本文已影响人

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图5 不同居群头花蓼的SCAR标记

Fig.5 The SCAR marker of Polygonum capitatum in different populations

3 讨论

中药传统的表型鉴定易受生长发育、环境因素以及加工炮制影响而使一些近缘药材、伪药材不易被准确鉴定，而DNA分子标记技术具有快速、微量、特异性强、准确可靠等特点，不受生物体生长发育阶段、供试部位、环境条件、贮藏等因素的影响，在药用动、植物分类、遗传多样性研究与种质资源评价，中药材的鉴定与道地性研究等方面展示了广阔的应用前景^[12-14]。

SCAR标记成本低廉，操作简单方便，适合于近缘种的快速分析^[13-14]。但通常情况下，SCAR标记转换的成功率是很低的^[13]，这也是目前发展SCAR标记的一个主要困难，在进行转换的过程中，将RAPD转化为SCAR标记并不是理想中那么容易，其中只有一部分可以完成这一转变，如本文在RAPD扩增中，虽获得2个特异性片段，但只有其中1个片段被成功转化为 SCAR 标记。

本文在多次调整实验条件的基础上，成功建立了头花蓼药材的SCAR标记，所设计的Z1-2号引物能清晰扩增获得头花蓼300 bp的DNA条带，特异性和重复性较好，解决了RAPD标记不稳定和高成本的问题，为头花蓼破碎药材的鉴定提供了一种新方法。

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Study on sequence characterized amplified region （SCAR）

markers of Polygonum capitatum

ZHOU Tao XIE Yu ZHANG Li-yan 1， WEI Sheng-hua， JIN Yan-lei1

（1. Guiyang college of Traditional Chinese Medicine， Guiyang 550002， China；

2. Cuizhou Weimen Pharmaceutical Co.， Ltd.， Guiyang 550018， China）

[Abstract] Objective： To establish sequence characterized amplified region markers of Polygonum capitatum . Method： The random primer was screened through RAPD to obtain the specific RAPD marker band， and the band was separated， extracted， cloned and sequenced. The specific primers were designed for conventional PCR reaction on the basis of the specific band， and the SCAR marker was acquired. Result： Screening from 50 RAPD primer， only C29 primer had 2 specific bands could distinguish P. capitatum from P. nepalense ， then 4 pairs of specific primers were designed based on the 2 sequences of RAPD marker bands， and only 1 pair primer （Z1-2） was successfully converted into SCAR marker after repeated tests. Conclusion： The Z1-2 primer could be used as an effective SCAR mark to identify Z300 DNA for P. capitatum . The SCAR mark was established and can be used as a molecular marker to distinguish P. capitatum from P. nepalense

[Key words] Polygonum capitatum ； Polygonum nepalense ； relative species； SCAR marker

doi：10.4268/cjcmm20131606

[责任编辑 吕冬梅]

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