人心果不同溶剂提取物的抗氧化活性研究
otp []4)vAzKii_mu{Ӈxwi]M4v駽8M4h]&/bnv3 iNTZ1NZ1Mtj%/TZ1i I{f"https://www.91miaoquan.com/k/duizhao/" target="_blank" class="keylink">对照，得到标准曲线（y=-7 978x+2 738.7，R²=0.975 3）。
取25 μL样品提取液，按照以上步骤反应，于同等条件下测定不同提取液的DPPH自由基清除能力（mmol·L-1Trolox·g-1DW），其含义为1 g测定测定物质中等量于Trolox的抗氧化活性。
2.3 FRAP法测定抗氧化能力
按照“2.2”配制Trolox母液并稀释编号。取1 mL蒸馏水与10 μL标准溶液混合稀释，摇匀后在体系中加入1.8 mL TPTZ溶液，混匀后在37 ℃反应10 min后于593 nm处测量吸光光度值，结果如表2所示，用蒸馏水作对照，得到标准曲线（y=5 043x-457.59，R²=0.989 7）。
取10 μL样品提取液，按照以上步骤反应，在相同条件下测定3个提取液的铁离子还原能力（mmol·L-1Trolox·g-1DW），其含义为1 g测定物质中等量于Trolox的抗氧化活性。
2.4 ABTS自由基清除能力测定
依据于靖[12]的方法，配制Trolox母液并稀释编号。取5 mLABTS溶液（7 mmol·L-1）和88 μL K2S2O8水溶液（140 mmol·L-1），避光反应12 h后于732 nm处测量吸光光度值，结果如表3所示，用蒸馏水作对照，得到标准曲线（y=-4 730.9x+3 210.4，R²=0.988 8）。
取25 μL样品提取液，按照以上步骤反应，于同等条件下测定3个提取液的ABTS自由基清除能力（mmol·L-1Trolox·g-1DW），其含义为1 g测定物质中等量于Trolox的抗氧化活性。
2.5 总黄酮测定
参照李洪芹[13]的总黄酮提取方法并加以改进，按照下表配制不同浓度芦丁。取1 mL芦丁溶液与0.15 mL的5% NaNO2混合，反应6 min;反应结束后继续加入0.15 mL的10% AlCl3，反应6 min;再向體系中加入2 mL 4% NaOH及5 mL蒸馏水，反应15 min。在420 nm处测定吸光值，结果如表4所示，得到标准曲线（y=0.920 3x-0.000 1，R2=0.998 7）。
取1 mL样液，按照以上步骤反应，于同等条件下测定3个提取液中的总黄酮含量，结果以芦丁等价值g/100 g-1表示。
2.6 数据分析方法
采用IBM SPSS Statistics V21.0软件进行数据分析，显著性水平为0.05。
3 结果与分析
3.1 DPPH自由基清除能力
如图1所示，人心果果实样提取液具有一定的DPPH自由基清除能力，不同组别存在一定的差异。在清除能力上，乙酸乙酯提取液的抗氧化活性强度高于其余4种，水、石油醚、70%乙醇提取液测得的结果活性强度一般，甲醇测得的人心果抗氧化活性强度最差。
3.2 还原抗氧化能力（FRAP）
如图2所示，在人心果的FRAP法测定抗氧化能力测定中，5种提取物均显示出一定的还原能力，不同组别存在一定差异，提取剂分别为70%乙醇和甲醇的两组还原抗氧化能力大致相同，明显高于其他组，而提取剂为石油醚、乙酸乙酯时，还原抗氧化能力最弱。
3.3 ABTS自由基清除能力
图3为ABTS法测定人心果样液清除ABTS自由基的结果。不同组别存在一定差异，选用70%乙醇测得的活性强度最高，其次为水和甲醇，石油醚和乙酸乙酯的活性强度最弱。
3.4 总黄酮含量测定
从图4可知，在人心果的总黄酮含量测定中，不同组别测定的含量存在一定差别。乙酸乙酯组测定的结果明显较高，甲醇及70%乙醇的总黄酮含量一般且基本相同，含量最低的是石油醚和水。
3.5 相关性分析
通过表5可知，在0.05水平（单侧）上，ABTS自由基清除法与FRAP法测得抗氧化活性强度呈显著相关，使用DPPH法测得的活性强度结果与总黄酮含量相关。
3.6 Topsis综合分析
为进一步综合研究比较各种提取剂对人心果测定结果的影响，研究对测定的结果采用了Topsis综合分析。
从表6中可得知，经过综合分析比较，这5种溶剂中用70%乙醇提取人心果抗氧化活性物质效果最佳，其次是乙酸乙酯、甲醇和水，石油醚效果最差。
4 结论与讨论
近年来，抗氧化活性研究在不同溶剂提取某种物质的相关研究中较为常见，牛德芳等[14]对油菜蜂花粉、蜂粮的水和醇提取物研究中发现，利用醇提取的蜂花粉和蜂粮测定结果比水好。赵玉红等[15]用多种溶液对蔷薇叶花青素、总黄酮、总酚进行提取并测定抗氧化活性，发现60%乙醇提取物的含量较高。田强等[16]对厚朴籽不同溶剂的萃取物进行比较分析，得到的结论是乙酸乙酯提取效果最好，与本实验中通过Topsis分析后发现乙酸乙酯组的活性较强的结论类似。如果需要全面、科学地评价研究对象的抗氧化能力，应采用更合理科学的抗氧化活性测定方法进行测定，如ORAC法。ORAC法测量总体抗氧化能力，可以客观地反映出即刻脂质过氧化程度[17]。
通过结果分析可知，提取剂的不同会影响到人心果抗氧化活性的测定结果，在这5种提取剂中，乙酸乙酯最适合用于DPPH法对人心果的测定，70%乙醇、甲醇适合用于FRAP法对人心果的测定，70%乙醇适合用于ABTS法对人心果的测定。通过综合分析之后，70%乙醇是较适合人心果的提取剂。此外，从结果分析中可以知道DPPH法结果与总黄酮含量在0.05水平（单侧）上相关，人心果的抗氧化能力与总黄酮含量也存在良好的相关性。
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（责任编辑：赵中正）